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BJ-01X6366
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暫無
更新時間
2023-05-26 09:56:42
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京公網(wǎng)安備 11010802023672號
中文名稱：Annexin V-kFluor594細胞凋亡檢測試劑盒(熒光顯微鏡)
英文名稱：Annexin V-keyFlour594 Apoptosis Detection Kit
產(chǎn)品規(guī)格：10T|20T|50T|100T
發(fā)貨周期：1～3天
注意事項：
在正常細胞中，磷脂酰絲氨酸（PS）只分布在細胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，而在細胞凋亡早期，細胞膜中的磷脂酰絲氨酸（PS）由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。Annexin V 是一種分子量為35~36kD 的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白，與磷脂酰絲氨酸有高度親和力，故可通過細胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結(jié)合。因此Annexin V 被作為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標。將Annexin V 進行熒光素kFluor594 標記，以標記了的Annexin V 作為熒光探針，利用熒光顯微鏡可檢測細胞凋亡的發(fā)生。
本試劑盒可用于懸浮細胞以及貼壁培養(yǎng)的細胞，不適用于組織。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及*濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（完全培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供*價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
產(chǎn)品名稱
英文名稱
規(guī)格
貨號
Annexin V-kFluor594細胞凋亡檢測試劑盒(熒光顯微鏡)
Annexin V-keyFlour594 Apoptosis Detection Kit
10T|20T|50T|100T
BJ-01X6366
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
62687-22-3野菊花內(nèi)酯 規(guī)格： HPLC≥98%;10mg
15085-71-9小蕓木素 規(guī)格： HPLC≥98%;10mg
550-24-3酸藤子酚 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
67400-17-3(S型)人參皂苷Rh2 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
2673-40-7派利文堿 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
490-79-9龍膽酸 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
規(guī)格： HPLC≥98%;0.2ml
25712-94-1高熊果酚苷 規(guī)格： HPLC≥98%;10mg
3,6-O-二啡?？鼘幩?規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
60132-35-6臭靈丹二醇 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
83905-01-5阿奇 規(guī)格： HPLC≥98%;100mg
白頭翁皂苷E-1 規(guī)格： HPLC≥98%;10mg
Annexin V-kFluor594細胞凋亡檢測試劑盒(熒光顯微鏡)電鏡脫鈣液 100ml|500ml
脫鈣后堿處理液 500ml
抗酒石酸酸性磷酸酶染色液 3×10ml|3×20ml
酸性磷酸酶染色液(偶氮偶聯(lián)法) 3×10ml|3×20ml
β-半乳糖苷酶染色試劑盒(細胞) 100T
β-半乳糖苷酶染色試劑盒(組織) 100T
細胞色素氧化酶染色液(對苯二銨法) 4×50ml
脫鈣終點檢測試劑盒(化學法) 100T
蔗糖-PBS溶液(5%) 500ml
甲酸水溶液(10%) 500ml
蔗糖-PBS溶液(10%) 500ml